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第二百四十八章 不可思议

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除了平板实验之外,秦霜还交给陆成的另外一个实验就是Transwell侵袭实验,侵袭实验其实和平板划痕实验的性质是差不多的。

但是两者的目的却是稍有差别。

很容易理解,平板划线法是在平板上,也就是一个平面上,细胞的迁移速率,与正常组细胞进行对比,从而得出处理组的迁移速率是快还是慢。

但是Transwell却是不一样的,因为Transwell小盒子的上层铺了一层胶质,这一层胶质可以阻挡细胞的下移,只有细胞分泌出可以溶解这一层胶质的金属蛋白酶,才能够破开胶质,然后达到营养更加丰富的下层。

这是针对肿瘤细胞侵袭能力,也是它能够分泌金属蛋白酶,穿破一定的障碍物的能力,发生侵袭的实验。

所以其实两个实验的模式是完全不一样的、

因为秦霜已经养好了细胞,所以陆成再进行后续的操作的时候,就直接省去了再要重头开始养细胞的步骤,

而两个实验中,平板划线法的实验最多只需要48h即可,但是这个实验唯一有的麻烦就是,必须在6、12、18、24和48小时的时候,记录下划痕缩小的面积,以此来算迁移比率。

是相对比较消耗时间的一种。而Transwell实验,也是需要计算下层更加丰富的营养基质中细胞的数量,来计算两组细胞侵袭能力的差异的。

如此一来,陆成除了明天晚上必须要守在实验室之外,后天的相同时间,也要来到实验室再进行一次统计,这样与他后天的手术,略有冲突。

虽然最后是有冲突的,但是陆成还是选择了在今天就完成了相应的操作。因为在细胞铺满平板之前,需要经过二十四小时的沉淀,才能够均匀的铺满,然后好进行划线的操作。

大不了,后天让一个师姐或是师哥帮他看一下就行了。

看到陆成利索地完成了相应的操作,秦霜也是放下了心来。

这看似是一种破罐子破摔的行为,但是其实也是对陆成一些基础实验的一种考验,如果陆成连平板划线的前期准备工作都做不好,那么后续的实验操作,他可能就真的需要一点一点来学的。

而且,秦霜还注意了陆成在做Transwell实验前期准备的一个细节,那就是让肿瘤细胞处于饥饿状态。

处于饥饿状态,也就是营养不足一段时间的肿瘤细胞,是更加迫切地需要大量的营养的,这样可以更加增加它的侵袭力,让实验的操作更加具有说服力。

……

而与此同时,陆成在完成了这两步的前期准备之后,也是有实验室的其他人,慢慢地给陆成布置了任务了。

就比如说费恩教授的两个博士生,凯瑟琳和查尔斯,都是把简单的细胞培养的操作,交给了陆成。

虽然讲,细胞的培养,也就是换液、分装这些最为基本的操作,但是,这是一个好的开始,陆成明白自己才来实验室第二天。

就有师兄和师姐愿意给他操作让他练习,这就是一个好的开始了,也代表了别人的认可。

有了基础的实验放手了,那么后续的实验,还会晚吗?

当天的下午,就有一个师兄主动地带着陆成完成了一次WB的相应操作,并且,还有一位做了过表达基因转录处理细胞组的师姐,还带着陆成做了RT-PCR的操作。

陆成知道这个RT-PCR的操作目的。

这是进行很多实验中都是比较重要的一环。

比如说,我们需要研究一个基因,那么一般都至少会分成以下几组。

第一组,某个基因的普通对照组,也叫阴性对照组,也就是不进行任何的处理。

第二组,则是某个基因的过表达组,使得这个基因在某一个细胞的基因序列中高表达,高表达之后,看它后续实验中,是否会出现与阴性对照组不一样的地方,来进行判别基因的功能。

同样的,为了避免它增多的阳性效果带来的误差,同时会对这个基因进行沉默或是敲除,也就是在沉默了这段基因,不让它表达功能的时候,与阴性组对比,是否会出现一系列的差异。

如此更具有说服力。

这是常规的第三分组。

第四分组,如果需要实验更加的完善的话,那么肯定还需要用一个专门的基因沉默的药物,与正常组作比较,证实它是可以通过药物来沉默的,以验证这个基因具有研究价值,甚至可能用于临床。

以上的四个分组相互比较之后,就是一组比较完善的实验组的分配了,做到这么系统的对比,说服力自然是大大加强。

但是,这一切对照组有效的前提就是,你得证明你的确是过表达了或是沉默了基因。

这个时候,就需要RT-PCR来验证基因序列的表达量了,也是用来筛选可能出现的,转染不成功,或是转染效率很小的情况。

很多的实验,很可能有人因为麻烦、费钱就会省掉这一步,但是这并不符合一个比较严谨的实验流程的。

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